Analise de Mutação nos Éxons 8 e 17 do gene KIT

Mutações no éxon 17 do gene KIT contribuem para o estabelecimento diagnóstico de Mastocitose (D816V, N822K). Mutações no éxon 8 e 17 do gene KIT são encontradas na frequência de 25-35% em Leucemia Mielóide Aguda (LMA) positivas para os genes de fusão RUNX1/RUNX1T1 e CBFB-MHY11 (INV16) e, quando presentes, podem conferir prognostico desfavorável . Entretanto, a detecção da mutação não deve ser utilizada para restratificação do grupo de risco original. Estratificação para uso de inibidor tirosina quinase em pacientes diagnosticados com Mastocitose.

Para que serve este exame?

Este exame está indicado para aqueles pacientes com suspeita clínica/laboratorial de mastocitose/leucemia mielóide, exame este que pode auxiliar o diagnóstico e a definição da terapêutica da mastocitose além de poder estabelecer a estratificação de risco para pacientes com leucemia mieloide aguda (LMA) com t(8;21) ou inv16.

Dados indisponíveis

• Este exame não necessita de jejum.
• Este exame necessita de agendamento prévio, se material for de medula óssea.
• Informar os medicamentos em uso.
• Não se aplica.
• Obrigatória apresentação do pedido médico, preenchimento do questionário e assinatura do termo de consentimento. Altamente recomendado que o pedido médico apresente um breve relatório/ história clínica sobre a suspeita diagnóstica, pois isto é essencial para análise e interpretação do exame.
• Sangue Medula óssea
• Se a solicitação for em material de medula óssea, favor verificar a agenda junto com o exame mielograma e as unidades realizadas desta coleta.

Amostras contendo o segmento de interesse (éxon 8 e 17) do gene KIT são amplificadas por reação em cadeia da polimerase (DNA PCR). Após verificação da amplificação em gel de agarose, os produto de PCR de 163pb (éxon 8) e 172pb (éxon 17) produto são purificados por colunas GFX (GE®), segundo especificações do fabricante e quantificados em aparelho Nanodrop. A reação de sequenciamento bi-direcional e realizada utilizando-se Big Dye e a corrida eletroforética capilar realizada em plataforma 3130xl (Applied Biosystems). Eletroferogramas são analisados com o software Mutation Surveyor V3.3 (SoftGenetics LLC).

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