Nota1- Mutacoes no exon 17 do gene KIT contribuem para o estabelecimento diagnostico de Mastocitose (D816V, N822K) Nota2- Mutacoes no exon 8 e 17 do gene KIT sao encontradas na frequencia de 25-35% em Leucemia Mieloide Aguda (LMA) positivas para os genes de fusao RUNX1/RUNX1T1 e CBFB-MHY11 (INV16) e, quando presentes, podem conferir prognostico desfavoravel . Entretanto, a deteccao da mutacao nao deve ser utilizada para restratificacao do grupo de risco original. Nota3- Estratificacao para uso de inibidor tirosina quinase em pacientes diagnosticados com Mastocitose. Rotina: Amostras contendo o segmento de interesse (exon 8 e 17) do gene KIT sao amplificadas por reacao em cadeia da polimerase (DNA PCR). Apos verificacao da amplificacao em gel de agarose, os produto de PCR de 163 pb (exon8) e 172 pb (exon17) produto sao purificados por colunas GFX (GE®), segundo especificacoes do fabricante e quantificados em aparelho Nanodrop. A reacao de sequenciamento bi-direcional e realizada utilizando-se Big Dye e a corrida eletroforetica capilar realizada em plataforma 3130xl (Applied Biosystems). Eletroferogramas sao analisados com o software Mutation Surveyor V3.3 (SoftGenetics LLC).

Para que serve este exame?

Este exame está indicado para aqueles pacientes com suspeita clínica/laboratorial de mastocitose/leucemia mieloide, exame este que pode auxiliar o diagnóstico e a definição da terapêutica da mastocitose, além de poder, estabelecer a estratificação de risco para pacientes com leucemia mieloide aguda (LMA) com t(8;21) ou inv16.

Cópia do pedido médico

Recomenda-se que o pedido médico apresente um breve relatório/história clínica sobre a suspeita diagnóstica, pois isso é essencial para a análise e interpretação do exame (não obrigatório)

• Este exame não necessita de jejum.
• Informar os medicamentos em uso.
• Obrigatória apresentação do pedido médico, preenchimento do questionário e assinatura do termo de consentimento.
• Não se aplica.

O DNA é extraído da amostra biológica, é realizada uma PCR para o gene requisitado (ou região de um gene) e o produto é preparado para posterior sequenciamento de Sanger, em um sequenciador automático. A numeração do transcrito e feita a partir da base A do códon de iniciação ATG. As variantes são anotadas, classificadas e interpretadas conforme a sequência, referência e quadro clínico relatado na solicitação medica.